Microdisección por captura láser (LCM): expresión génica en células individuales a partir de muestras complejas
Contacto: Dra. Milena Durando (mdurando@fbcb.unl.edu.ar)
LCM es una técnica que permite aislar poblaciones celulares con alto grado de pureza. Tiene como requisito esencial el cuidado de la muestra (tanto en su obtención como su procesamiento). Existen distintos especímenes que pueden usarse como muestra: cortes histológicos, preparaciones tipo cytospin, células provenientes de cultivos. Entre las ventajas de la técnica: no daña la morfología ni los componentes celulares, puede aplicarse luego de “marcar” una proteína de interés (mediante inmunohistoquímica o inmunofluorescencia), requiere cantidades relativamente pequeñas de muestra.
La técnica permite:
- Extracción de ADN, ARN
- Extracción de proteínas
- Expresión de genes/proteínas
- Evaluación de actividad enzimática
- Evaluación/identificación de metabolitos
Aplicaciones:
- Oncogénesis: búsqueda de proteínas específicas
- Reproducción: búsqueda de mutaciones (ej: asociadas a infertilidad)
- Investigación forense: identificación de individuos
- Investigación básica: perfil génico en células individuales
- Odontología: cáncer de cavidad oral, desarrollo y pulpa dentarios